数码荧光显微镜是活体动物荧光成像技术的核心技术,广泛应用于生物、工业检测、司法和刑事等领域。它不仅是荧光防伪印刷检测的重要工具,也是矿物研究的理想仪器。
数码荧光显微镜观察标本的制备要求有哪些?
1、载玻片
滑块的厚度应在0.8到1.2mm之间。如果载玻片太厚,一方面会吸收更多的光,另一方面又不能使激发光聚集在标本上。载玻片必须光滑、厚度均匀且无明显的自发荧光。石英玻璃有时用作载玻片。
2、盖玻片
盖板玻璃厚度约0.17mm,光滑。为了增强激发光,也可以使用干盖玻璃。这是一种特殊的盖板玻璃,涂有几层物质(如氟化镁),对不同波长的光有不同的干涉效应。它可以使荧光顺利通过并反射激发光。这种反射的激发光可以激发样品。
3、标本
组织切片或其他标本不应太厚。例如,大部分激发光被消耗在试样的下部,而被物镜直接观察到的上部不能被充分激发。此外,单元重叠或杂质掩蔽可能会影响判断。
4、封裱剂
甘油通常用作密封剂和封固剂。它必须是无色透明且无自发荧光的。荧光亮度在pH8.5-9.5之间明亮,不易快速褪色。因此,常用甘油与0.5mol/lph9.0-9.5碳酸盐缓冲液等量混合作为密封剂。
5、镜油
一般在用暗场数码荧光显微镜和油镜观察标本时,必须使用镜油。最好用专用的非荧光镜片油,或者可以用上面的甘油代替,也可以用液体石蜡,但是折射率低,画质稍受影响。